Метод Вестерн-Блоттинга - Анимированное Видео

• Метод разделения и обнаружения белков, используется в клеточной и молекулярной биологии.  

• Включает разделение по размеру, перенос белка на твердую подложку и определение целевого белка с помощью антител.  

• Подготовка образцов, добавление загрузочного буфера с SDS, бета-меркаптоэтанолом, бромфеноловым синим и глицерином.  

• Нагрев до 95 градусов для денатурации белков и разделения по молекулярной массе.  

• Разделение белков в полиакриламидном геле, маркер молекулярного веса, гель помещается в камеру, заливается проточный буфер.  

• Электрическое поле разделяет белки, гель извлекается, белки переносятся на мембрану.  

• Мембрана пропитана блокирующим раствором, затем первичным и вторичным антителами, инкубация, промывка, добавление субстрата, хемилюминесцентное определение.  

• Анализ методом денситометрии для определения размера и присутствия белка.